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臨床醫(yī)學檢驗技士備考資料：溶血反應(yīng)的檢測試劑
為貫徹國家人事部、衛(wèi)生部《關(guān)于加強衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)職務(wù)評聘工作的通知》等相關(guān)文件的精神，自2001年全國衛(wèi)生專業(yè)初、中級技術(shù)資格以考代評工作正式實施。通過考試取得的資格代表了相應(yīng)級別技術(shù)職務(wù)要求的水平與能力，作為單位聘任相應(yīng)技術(shù)職務(wù)的必要依據(jù)。下面是小編整理的臨床醫(yī)學檢驗技士備考資料：溶血反應(yīng)的檢測試劑，歡迎閱讀！
溶血反應(yīng)的檢測試劑
(一)補體
檢測血清補體水平或補體活性時需要從受檢者采血及分離血清。做補體結(jié)合試驗時多采用豚鼠血清作為實驗用補體的來源。因為補體在體外極易衰變，所以檢測補體活性的血清標本和作為補體試劑的血清必須新鮮。
受檢者一般做靜脈采血，在動物可做心臟采血。血清分離后應(yīng)及時使用，最好在當日用完。必須保存時采用小量分裝的辦法，置-70℃下可保存數(shù)月，避免反復(fù)凍融。凍干制品可長期保存，但其活性都不同程度地比新鮮血清降低。
以豚鼠血清作補體來源時，應(yīng)考慮到個體差異。為了確保血清中補體的有效活性，必須取3只以上豚鼠的血清混合后使用。
(二)綿羊紅細胞
從綿羊頸靜脈無菌采血，抽出血液后立即小心地注入放有玻璃珠的無菌干燥三角燒瓶中，充分旋搖15～20min，以除去纖維蛋白。也可將羊血與等量或2倍量的Alsever血液保存液混合，既有抗凝作用，又適于儲存;分裝后置4℃，可使用3周。
實驗前，取適量抗凝血，加入8～10倍的生理鹽水，輕輕混勻后2000r/min離心5min;棄上清，沉淀的紅細胞用生理鹽水再洗一次，這時上清為無色澄清，如顯紅色說明有溶血現(xiàn)象，應(yīng)更換新鮮羊血;第三次用緩沖液洗滌，棄上清，取壓積紅細胞用緩沖液配制SRBC懸液，使用濃度一般為2%～5%。為使紅細胞濃度標準化，可吸取少量紅細胞懸液，中入20～30倍的稀釋液中，在542nm波長比濁，以吸光度為標準調(diào)整紅細胞濃度。
(三)溶血素
溶血素即抗綿羊紅細胞抗體，多是以綿羊紅細胞免疫家兔而得到兔抗血清。一般沒有必要進一步提純抗體，但在試驗前需先進行加熱56℃30min或60℃3min以滅活補體。
由于補體溶血試驗及補體結(jié)合試驗均是比較精密的試驗，其結(jié)果與溶血素的效價有關(guān)，所以試驗需要滴定溶血素效價;在制備抗血清的過程中，于動物采血前和分離抗血清后也需要滴定溶血素效價。
1.溶血素稀釋稀釋溶血素時，要先對效價有個大概的估計，以便確定稀釋度的范圍。動物采血前滴定時稀釋范圍要稍大些，實驗前的滴定便以原先的記錄作為參考(溶血素的效價多在數(shù)千單位以上)。溶血素稀釋一般不采用連續(xù)倍比稀釋法，因為稀釋到最后時跨度太大，不容易確定單位。為了便于操作，現(xiàn)舉例按表14-1配制不同稀釋度的溶血素。
2.效價滴定將稀釋好的溶血素及其他試劑按表14-2所示逐步加入到各試管中，放置37℃水浴，不要蓋上水浴箱的蓋子，以免蓋子上冷凝的水蒸氣滴入試管內(nèi)引起非補體性溶血。30min后取出觀察結(jié)果。
溫育反應(yīng)后，完全溶血的試管內(nèi)液體紅色透明，放置一段時間后管底無細胞沉淀，離心后可見少許細胞碎渣。不溶血的管內(nèi)液體渾濁;放置后可見紅細胞沉淀，上清無色透明。不同程度的不完全溶血介于兩者的中間變化態(tài)。
按照以上標準，以產(chǎn)生完全溶血的最高稀釋管為最大有效反應(yīng)管，以該管的溶血素稀釋倍數(shù)為溶血素產(chǎn)效價。例如表14-2中的溶血素效價應(yīng)為1:4000;在1:4000稀釋的情況下，反應(yīng)液中所含溶血素的的量為1U/ml。
做補體活性測定或補體結(jié)合試驗時，一般使用2U/ml溶血素(在本例做1:2000稀釋)，與SRBC懸液等體積混合。
(四)稀釋緩沖液
磷酸緩沖液或巴比妥緩沖液等均可用于溶血試驗，pH值應(yīng)調(diào)至7.2～7.4之間。另加入適量氯化鈉以保持等滲，并適當?shù)丶尤胍恍┾}離子和鎂離子，這是補體活化所不可缺少的。有的配方還加入0.1%的明膠以使蛋白溶液穩(wěn)定;加入0.01%NaN3可以防腐，利于較長時間保存。
基礎(chǔ)知識篇
1．屬于血液中正常有形成分的是血小板
2．不屬于臨床血液學研究內(nèi)容的是淋巴細胞的分化和發(fā)育
3．正常人血液 PH 應(yīng)該在7.35~7.45
4．血漿滲透壓量正常人約為290~310mOsm/( kg ·H20)
5．血液的主要生理功能包括：運輸、協(xié)調(diào)、防御、維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等功能
6．在必要時，成人靜脈采血的部位可選擇股靜脈
7．皮膚采血的特點是耳垂采血檢查結(jié)果不夠恒定
8．真空采血法又稱為負壓采血法
9．屬于酸性染料的是伊紅
10．關(guān)于細胞成分化學特性，敘述正確的是血紅蛋白為堿性蛋白質(zhì)
11．晚幼紅細胞脫核成網(wǎng)織紅細胞的過程是完成在骨髓
12．關(guān)于紅細胞生理，描述正確的是紅細胞有交換和攜帶氣體的功能
13．毎克血紅蛋白可攜帶氧氣為1.34ml
14．新生兒紅細胞計數(shù)的參考值（6.0~7.0) X 1012幾 L
15．紅細胞 Hayem 稀釋液中硫酸鈉的主要作用是提高比密防止細胞粘連
16．枸櫞酸鈉在枸櫞酸鈉稀釋液中的主要作用是抗凝和維持滲透壓
17.1966年被 ICSH 推薦的血紅蛋白檢測參考方法是 HiCN
18．改良牛鮑計數(shù)板兩側(cè)支柱加蓋專用蓋玻片形成的計數(shù)池高為0.10mm
19．HiCN測定最大吸收峰位于540nm
20．HiN3檢測的最大吸收峰位于542nm
21．正常情況下，外周血中的血紅蛋白主要是氧合血紅蛋白
22．瑞氏染色血涂片中，正常紅細胞直徑范圍在6.0~9.5um
23．大4細胞是指4細胞自＞10um
24．關(guān)于嗜多色性紅細胞敘述正確的是胞質(zhì)內(nèi)尚存少量嗜堿性物質(zhì)
25．血細胞比容測定 ICSH 確定的參考方法是放射性核素法
26．溫氏法測定血細胞比容其結(jié)果應(yīng)讀取紅細胞柱還原紅細胞層
27．對血細胞比容敘述正確的是作為 MCV 計算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)
28．對紅細胞平均指數(shù)敘述正確的是 MCHC 的計算單位是 gL
29．RDW反映紅細胞的體積大小的異質(zhì)性
30．對紅細胞體積分布寬度敘述正確的是 RDW 可作為 IDA 的篩選診斷指標
31．標本中可影響 RDW 的因素是紅細胞碎片
32．有關(guān)網(wǎng)織紅細胞檢測原理敘述錯誤的是經(jīng)普魯士藍染色后可見連成線狀的網(wǎng)狀結(jié)4
33．ICSH推薦的血沉檢測的標準方法為魏氏法
34．魏氏法檢測血沉所采用的數(shù)值報告單位是 mm / h
35．在機體防御和抵抗病原菌過程中起主要作用的外周血中的細胞是中性粒細胞
36．正常狀態(tài)下衰老的中性粒細胞主要被破壞所在的系統(tǒng)是單核﹣吞噬細胞系統(tǒng)
37．在白細胞成熟過程中，最早出現(xiàn)特異性顆粒的細胞是中幼粒細胞
38．與白細胞無關(guān)的是 Howell － Jolly 小體
39．正常生理情況下，關(guān)于白細胞變化規(guī)律的正確敘述是早晨較低，下午較高
40．正常情況下，血涂片經(jīng)染色后中性粒細胞核象最多見的是三葉核
41．從原始粒細胞、早幼粒細胞到中幼粒細胞均有合成 DNA 的能力，這類粒細胞應(yīng)屬于分裂池
42．血液分析儀敘述正確的是儀器法對白細胞的分類不能替代顯微鏡分類
43．在電阻抗法中，與脈沖大小呈正相關(guān)的是細胞體積
44．目前血型的定義是指抗原抗體系統(tǒng)的遺傳特性
45.ISBT將紅細胞表面抗原按血型系統(tǒng)分為23個
46．紅細胞膜上的 ABH 抗原主要構(gòu)成物質(zhì)是糖蛋白和糖脂
47．酶介質(zhì)法作血型鑒定時，用蛋白酶處理紅細胞，主要是破壞紅細胞表面的唾液酸，使紅細胞表面負電荷減少
48．原尿中不存在的物質(zhì)是紅細胞
49．原尿中的葡萄糖被完全重吸收的場所是近曲小管
50．原尿中肌酐幾乎不被重吸收而隨尿排出體外
51．腎單位不包括集合管
52．少尿是指24h尿量少于400ml
53．成年人正常尿量為1000~2000ml/24h
54．鏡下膿尿為每高倍視野尿白細胞＞5個
55．小圓上皮細胞主要是指底層稱移行上皮細胞
56．屬于尿中異型紅細胞形態(tài)的是環(huán)形紅細胞
57．試帶法檢測尿液 PH 所用的指示劑是甲基紅和溴麝香草酚
58．本周蛋白尿?qū)儆谝绯鲂缘鞍啄?/p>
59．蛋白尿是指尿液中蛋白質(zhì)超過0.10g/ L
60．導(dǎo)致腎前性蛋白尿的疾病是擠壓綜合征
61．腎小管性蛋白尿見于器官移植
62．尿糖定性為陽性，血糖濃度超過8.88mmol/ L
63．酮體主要是機體內(nèi)脂肪的中間代謝產(chǎn)物
64．關(guān)于尿2-M的敘述錯誤的是2-M為腎小球性蛋白尿
65．反映腎小管功能損害最敏感的酶是尿 N ﹣乙酰﹣ B - D ﹣氨基葡萄糖苷酶
66．非孕婦尿中 HCG 的濃度＜2.0ng/ L
67．尿液分析儀的組成包括機械、光學、電路系統(tǒng)
68．普通膳食情況下，脂肪約占糞便干重的10%~20%
69．脂肪瀉是指正常成人24h糞便中的脂肪總量超過 g
70．細菌約占糞便干重的1/3
71．成人糞便中的主要菌群是大腸埃希菌、腸球菌、厭氧菌，約占80%
72．糞便中球菌和桿菌的比例約為1:10
73．霍亂、副霍亂時糞便性狀是米泔樣便
74．會造成大便隱血試驗假陰性的是服用大量維生素 C
75．阿米巴痢疾及過敏性腸炎的糞便中可見夏科﹣雷登結(jié)晶
76．膽道梗阻時，糞便呈現(xiàn)白陶土色是由于沒有糞膽素
77．前列腺液約占精液的30%
78．角化前細胞屬于表層細胞
79．癌細胞多形性和癌珠是高分化鱗癌的標志
80．腺癌是由柱狀上皮細胞惡變而來的癌
81．惡性腫瘤脫落細胞分化程度越高細胞形態(tài)畸形越明顯
82．惡性腫瘤脫落細胞分化程度越低胞質(zhì)量越少
83．屬于嗜酸性物質(zhì)的是嗜酸性顆粒
84．屬于嗜堿性物質(zhì)的是細胞核蛋白
85．既含酸性物質(zhì)，又含堿性物質(zhì)的是中幼紅細胞
86．成年人外周血淋巴細胞絕對值是（0.8~4)X109/L
87．新生兒外周血白細胞總數(shù)的參考值范圍是（15~20) X 109/L
88．體外保存制品一般條件下，半衰期最短的是純化因子 VIII
89．白細胞制品輸注后易產(chǎn)生免疫反應(yīng)
90．燒傷患者需大量輸注的制品是白蛋白制品
91．表層移行上皮細胞又稱為尾形上皮細胞
92．來自腎小管的上皮細胞是復(fù)粒細胞
93．尿液中主要以清蛋白為主見于腎小球性蛋白尿
94．尿液中主要以本周蛋白為主見于溢出性蛋白尿
95．尿液中主要以α1-M和β2-M蛋白為主見于腎小管性蛋白尿
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