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2017衛生資格《檢驗技士》復習筆記
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細胞酶的釋放影響因素
細胞靠細胞膜來維持其完整性，細胞膜代謝十分活躍，依靠膜上一系列ATP依賴的離子泵來維持細胞內外Na+、K+和Ca2+濃度的差異，這過程需要耗費大量能源，當缺氧或能量代謝障礙、ATP供應減少、離子泵功能障礙時，無法維持正常離子的梯度差，改變了細胞的內滲透壓，從而引起細胞腫脹，特別是Ca2+進入細胞內，引起細胞膜的泡狀突出，膜孔隙增大，酶開始從細胞內向外溢出，其速度和數量受多種因素影響。
主要的有：
⒈細胞內外酶濃度的差異
對于非血漿特異酶，細胞內外濃度差可在千倍以上，因此只要有少量細胞壞死或者細胞有輕度病變，血中酶濃度就可能明顯升高。有人計算過只要有1/1000肝細胞壞死，所釋放的酶可使血中酶增加一倍。鳥氨酸氨甲酰基轉移酶(OCT)在細胞內外濃度差異可達到105：1，此酶在肝臟病變時變化極為明顯，可惜的是，由于測定方法不方便，臨床應用不多。但對于血漿特異酶而言，由于細胞內外濃度差異小，細胞病變很少引起血中酶濃度明顯升高。
⒉酶在細胞內定位與存在形式
從上述酶釋放的機制不難理解最容易釋放入血的是胞質中游離的酶，如ALT，LD等。而在細胞亞顯微結構中的酶則較難溢出，除非細胞病變進一步加重，不局限于細胞膜。特別是線粒體酶，由于有兩層致密的線粒體膜，往往當細胞出現壞死病變時，才開始釋放入血。在一個典型的AMI病程中，線粒體AST是最后一個出現升高的酶，而且到達峰值時間也最遲。臨床通過線體酶的測定，有助于判斷疾病的不良預后。又如肝細胞中AST大部分存在于線粒體，雖然其絕對量超過ALT，但在急性肝炎時，由于細胞病變較輕，胞質中含有大量ALT，故血中ALT往往超過AST.而在肝硬化時，主要病變為肝細胞壞死，線粒體中AST大量溢出，血中往往AST大于ALT.
細胞膜上也含有多種酶，如γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)大量存在于肝中毛細膽管上皮膜上，當膽道梗阻、膽汁潴留在肝中時，膽汁酸鹽有表面活性劑作用，可將GGT從細胞膜上洗脫下來，而此時不一定伴有細胞膜病變。正因為血中不同酶變化機制有差異，這樣GGT和ALT在各種肝膽疾病時的變化常不一致。
⒊酶蛋白分子量的大小
不少實驗都證實酶的釋放速度大致與酶的分子量成反比。由于臨床上測定的十余種酶之間分子量差異不太大，此因素對血中酶濃度高低影響恐不如上述因素，但對酶在血中出現升高時間先后有相當大影響。例如在AMI時，血中最先升高的CK分子量為85000，而分子量為125000的LD出現升高明顯推遲。
白細胞計數知識總結
一、檢測原理
白細胞計數是測定單位體積血液中各種白細胞總數。包括顯微鏡計數法和血液分析儀計數法。
二、方法學評價
1、顯微鏡計數法：
簡便易行、不需昂貴儀器，但重復性和準確性較差，受微量吸管、血細胞計數板、細胞分布、人為因素等多種情況影響。
2、血液分析儀計數法：
計數細胞數量多、速度快、易于標準化、計數精確性較高，適合大規模人群健康篩查，但需特殊儀器。某些人為因素(如抗凝不充分)、病理情況(如出現有核紅細胞、巨大血小板、血小板凝集等)可干擾白細胞計數。使用前須按NCCLS規定方法對儀器進行校準，且須認真堅持日常質控工作。
三、參考值
血細胞自動計數儀、顯微鏡計數法：
成人：(4.0～10.0)×109/L (4000～10000/mm3).
新生兒：(15.0～20.0)×109/L(15000～20000/mm3).
嬰兒：(15.0～20.0)×109/L.
兒童：(5.0～12.0)×109/L.
四、臨床意義
1.生理變化
(1)年齡：新生兒計數較高，可達(15～30)×10^9/L，通常在3～4d降至10×10^9/L.(2)日間變化：一般安靜松弛時白細胞較低，活動和進食后較高;早晨較低，下午較高，一日之內可相差1倍。
(3)運動、疼痛和情緒影響：劇烈運動、劇痛、極度恐懼等均可使白細胞短時升高。
(4)妊娠與分娩：妊娠期特別是最后1個月白細胞升高，分娩時可達34×10^9/L，產后2～5d恢復正常;女性絕經期、月經期則可降低。
(5)飲酒、大量吸煙、冷浴亦可升高由于生理因素，同一檢測對象白細胞計數甚至可波動50%.
2.病理變化
(1)升高：
①各種球菌引起的急性感染及化膿性炎癥：中耳炎、扁桃體炎、闌尾炎、膿腫等;
②全身感染：肺炎、敗血癥、猩紅熱等;
③中毒：尿毒癥、糖尿病酸中毒、汞中毒、鉛中毒;
④急性出血、急性溶血、手術后;
⑤惡性腫瘤、粒細胞血液病等;
⑥類白血病反應。
白細胞在20×10^9/L以上，說明存在嚴重感染。
(2)降低：
①病毒感染：重癥肝炎、流行感冒、麻疹等;
②某些傳染病：如傷寒、副傷寒、瘧疾等;
③某些血液病如再生障礙性貧血、白細胞減少性白血病、粒細胞缺乏癥;
④化學藥品及放射損害如X線照射、鐳照射、晚期砷中毒等;
⑤自身免役性疾病及脾功能亢進等。
白細胞在2.5×109/L以下，是傳染病、中毒和骨髓再生障礙的重要危險值。
氯的測定之滴定法
(1)Molrr法：以K2CrO4為指示劑，用AgNO3滴定血清中Cl-，以過量的Ag+與CrO42-結合出現Ag2CrO4紅色沉淀為終點，根據AgNO3消耗量計算出標本中Cl-的量。
(2)Sehales法：以二苯卡巴腙作指示劑，用Hg(NO3)2滴定血清中Cl-，以過量的Hg2+與二苯卡巴腙結合成不溶的紫藍色化合物為終點，根據Hg(NO3)2消耗量計算血清Cl-的量。
滴定法需要熟練的操作，終點要準確，盡可能排除主觀因素的干擾，否則誤差很大。
血清中過多的膽紅素。血脂及血紅蛋白(溶血)對結果干擾很大。滴定法有淘汰的趨勢。
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