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2017檢驗(yàn)技師考試化學(xué)檢驗(yàn)：孕酮(P)的主要功能與檢測(cè)
導(dǎo)語(yǔ)：孕酮(progesterone，P)是21C類固醇激素，由膽固醇經(jīng)孕烯醇酮通過(guò)異構(gòu)酶轉(zhuǎn)化而成。在非妊娠婦女，卵巢中的卵泡膜細(xì)胞產(chǎn)生P，妊娠期間，P則主要由胎盤(pán)合體滋養(yǎng)細(xì)胞層分泌，故血中P水平主要與胎盤(pán)重量及血液灌注量相關(guān)。
孕酮(P)：女性主要由卵巢和胎盤(pán)產(chǎn)生。
孕酮的主要功能是促進(jìn)子宮內(nèi)膜增厚，腺體增生，為受精卵植入做準(zhǔn)備。
從孕酮濃度的升降可以推測(cè)卵巢濾泡和黃體的活動(dòng)，因此血液中孕酮測(cè)定在臨床上用于監(jiān)測(cè)未懷孕婦女的排卵和黃體的正常功能，孕酮療法監(jiān)控及早期妊娠的評(píng)價(jià)等，在判斷黃體功能狀態(tài)上具有特別重要的意義。對(duì)不懷孕婦女和反復(fù)自然流產(chǎn)婦女可幫助查找原因。在月經(jīng)周期中，孕酮的濃度：濾泡期：0.14～1.61μg/L.排卵期后明顯上升，黃體期達(dá)：2.41～31.2μg/L，并與血中E2的增加平行。
妊娠足月時(shí)可高達(dá)：150～200μg/L.血清孕酮的升高：見(jiàn)于葡萄胎、輕度妊娠高血壓綜合征、糖尿病孕婦、多胎、繼發(fā)性高血壓、先天性17-a羥化酶缺乏癥、先天性腎上腺增生、卵巢顆粒層膜細(xì)胞瘤、卵巢脂肪樣瘤。
孕酮的降低：見(jiàn)于先兆流產(chǎn)、黃體功能不良、胎兒發(fā)育遲緩、死胎、嚴(yán)重妊娠高血壓綜合征。
在月經(jīng)周期第18～26天，測(cè)三次血P，如均小于15.9nmol/L(5ng/ml)可診為黃體功能不健。
注意事項(xiàng)
1、標(biāo)記品和標(biāo)準(zhǔn)品均由無(wú)水乙醇配制，容易揮發(fā)，應(yīng)將蓋子塞緊，貯于4℃冰箱。
2、抗血清稀釋成母液后應(yīng)存放在4℃，切勿放-20℃低溫處，以免反復(fù)凍融，降低抗血清效價(jià)。
3、明膠、活性炭、葡聚糖等試劑應(yīng)放在陰干燥處。
4、0.1% GPS在夏天，即使放在4℃，也很容易變質(zhì)，最好一次配量不要太多。如發(fā)現(xiàn)明顯混濁、發(fā)臭等變質(zhì)現(xiàn)象，應(yīng)予重配。
5、在進(jìn)行B、F分離時(shí)，由于DCC時(shí)樣品需保持恒定的接觸吸附時(shí)間，所以一批加樣管數(shù)不可能太多，時(shí)間不能太長(zhǎng)，控制在3～5min內(nèi)加完，待離心分離后，再加第二批。
6、在吸取活性炭溶液(DCC)時(shí)，必須保證DCC溶液的充分混勻，以免因DCC濃度的不均而影響分離效果。
7、抽提用CH2Cl2和配制用的無(wú)水乙醇必須重蒸后使用。
檢查過(guò)程
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：分別為0，10，20，50，100，200，400pg(復(fù)管)，60℃水浴壓縮空氣吹干，加補(bǔ)孕酮11000dpm/20μl吹干，各管加1∶5萬(wàn)0.2ml抗體，4℃恒溫過(guò)夜，次日加5g/L GPS 0.1ml，2.5g/L DCC 0.5ml，4℃放置10min，3000r/min離心10min吸出上清液0.4ml，加到8ml閃爍液中，混旋1min，避光放4h后用液爍儀測(cè)量。
另取四管，各加3H-孕酮11000dpm/20μl，吹干，加1g/L,GPS其中二管作總脈沖(T)。另二管作非特異性測(cè)定管(BN%)，BN%DCC分離法同標(biāo)準(zhǔn)曲線制作。
2、未知樣品的檢測(cè)：孕婦取血漿0.05ml或0.1ml，未孕婦或男性取0.2ml，于具塞試管中用重蒸餾水補(bǔ)足劑0.5ml，加0.1mol/L NaOH0.2ml，重蒸二氯甲烷5ml，抽提5min，靜置，棄去上層液，二氯甲烷用蒸餾水洗2次，每次1ml，清洗，1500r/min離心3min，吸取二氯甲烷抽提液雙份1ml，置45℃水浴蒸干，加3H-孕酮11000dpm/10μl，吹干，加1∶5萬(wàn)抗體0.2ml，以下操作與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同。
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