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臨床檢驗(yàn)技師2017年臨床免疫學(xué)備考講義
導(dǎo)語：免疫學(xué)是一門既古老而又新興的學(xué)科。免疫學(xué)的發(fā)展是人們在實(shí)踐中不斷探索、不斷總結(jié)和不斷創(chuàng)新的結(jié)果。一般認(rèn)為免疫學(xué)的發(fā)展經(jīng)歷了四個(gè)時(shí)期即經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時(shí)期、經(jīng)典免疫學(xué)時(shí)期、近代免疫學(xué)時(shí)期和現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)期。我們一起來看看考試重點(diǎn)吧。
1.外周血單個(gè)核細(xì)胞：包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，其比重在1.075~1.090，而紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞比重在1.092左右。分離淋巴細(xì)胞以密度1.077±0.001的分層液為佳。
分離方法：Ficoll分離液法，是一種單次差速密度梯度離心法。聚蔗糖-泛影葡胺是一種較理想的細(xì)胞分層液，商品名Ficoll。
2.淋巴細(xì)胞分離方法：貼壁黏附法、吸附柱過濾法、Percoll分離法
T、B細(xì)胞和T細(xì)胞亞群的分離方法：磁性微球分離法、熒光激活細(xì)胞分離儀分離法
3.淋巴細(xì)胞分類：T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞
4.輔助性T細(xì)胞的典型表面標(biāo)志：CD3+CD4+CD8+。(Th1主要分泌IL-2，IFN-γ或TNF-β等輔助細(xì)胞免疫或參與遲發(fā)型超敏反應(yīng);Th2主要分泌IL-4/5/6/10等輔助體液免疫、參與速發(fā)型超敏反應(yīng))
細(xì)胞毒性T細(xì)胞的典型表面標(biāo)志是CD3+CD4-CD8+。(CD3+CD8+CD30-可認(rèn)定為Tc1細(xì)胞;CD3+CD8+CD30+可認(rèn)定為Tc2)
調(diào)節(jié)性T細(xì)胞：自然存在的，其典型標(biāo)志為CD4+CD25+Foxp3+ (最重要的分子標(biāo)記是一種轉(zhuǎn)錄因子Foxp3)
成熟B細(xì)胞均表達(dá)CD19，B1細(xì)胞CD19+CD5+，B2細(xì)胞CD19+CD5-，B1主要分布在腹腔和胸腔，與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)，自身免疫病及B細(xì)胞源性腫瘤密切相關(guān)。B2主要分布在周圍免疫器官，是執(zhí)行體液免疫的主要細(xì)胞。
NK細(xì)胞的典型標(biāo)志：CD3-CD16+CD56+。
單核-巨噬細(xì)胞的典型表面標(biāo)志為CD14。
人成熟DC的主要特征表面標(biāo)志為CD1a、CD11c和CD83，但不表達(dá)MPS、T/B/NK細(xì)胞的典型表面標(biāo)志(CD14/3/19和CD20/16/56)。
5.T細(xì)胞增殖試驗(yàn)有：形態(tài)學(xué)檢查法，3H-TdR摻入法、MTT比色法
6.溶血空斑實(shí)驗(yàn)(PFC)：將經(jīng)SRBC免疫過的小鼠脾細(xì)胞與一定量的SRBC混合，在補(bǔ)體參與下，使抗體形成細(xì)胞周圍那些受到抗體分子致敏的綿羊紅細(xì)胞溶解，形成肉眼可見的溶血空斑，每一個(gè)空斑中央含一個(gè)抗體形成細(xì)胞，空斑數(shù)目即為抗體形成細(xì)胞數(shù)目。
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