臨床醫學檢驗技士備考資料：抗血清的鑒定

　　動物血采集后，立即分離出血清，此抗血清在保存或應用前，必須作效價和特異性鑒定。

　　(一)雙向免疫擴散法鑒定抗體的特異性

　　按雙向免疫擴散技術打兩排孔，上排放抗原粗提物(如抗原來自動物血清則放相應的混合血清)和純化抗原，下排加抗血清，進行雙擴散18～24h后，仔細觀察上下兩排孔之間出現的沉淀線。若與粗抗原及純抗原之間皆出現一條沉淀線，且兩者互相融合，則證明該動物已產生單價特異性抗體;不出現沉淀線，表明示免疫成功。若與純化抗原出現一條，而與粗抗原出現多條線，且其中一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接，也是成功的免疫，待取血后將雜抗體吸收去除，可以成為單價特異性抗體。

　　(二)雙向免疫擴散法則定抗血清效價

　　測定抗血清效價有兩種稀釋方法：一是稀釋抗血清，如1/2、1/4、1/8、1/16對倍稀釋，分別與一個濃度的純抗原反應;另一是稀釋抗原，即把抗原作對倍稀釋或按濃度(如mg/ml)進行稀釋，分別與不同濃度的抗血清進行雙擴散試驗(稱為棋盤滴定)，見表10-1。

　　表10-1抗血清效價測定

　　表中+～+++代表出現沉淀線的濃度，如1:8抗體出現中等濃度沉淀線，與1:16、1:32則出現較弱的沉淀線。按表10-1的互為比例稀釋后確定抗血清的效價為1:32，最佳抗原濃度為1:16。效價在1:8以上即可采用于一般試驗。

　　(三)其他鑒定方法

　　有時，因抗原特殊，沉淀線不易出現，特別是制備的抗血清將用于某種試驗時，則考慮用其它方法(如血凝試驗、抑制試驗、中和試驗、放射免疫技術等)測定其效價。

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