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嚴(yán)重脂血標(biāo)本時生化項(xiàng)目的檢測該如何處理
脂血標(biāo)本是臨床檢驗(yàn)常見的干擾原因。血脂中的CM和VLDL是懸浮顆粒,對生化檢測常用的比色法或比濁法有極大干擾。對于重度脂血樣本,由于樣本的本底吸光度過高,必須對樣本進(jìn)行預(yù)處理。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P(guān)于嚴(yán)重脂血標(biāo)本時生化項(xiàng)目的檢測該如何處理的知識,歡迎閱讀。
嚴(yán)重脂血標(biāo)本時生化項(xiàng)目的檢測該如何處理
1、生理鹽水稀釋法:大部分全自動生化分析儀都具有自動稀釋、自動換算功能;也可以先手工稀釋,再將測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。這種方法可以在一定程度上降低樣本空白而提高測定的準(zhǔn)確性,但是該法并不能完全消除脂濁對測定結(jié)果的影響,特別是要注意樣本稀釋后由于基質(zhì)效應(yīng)而導(dǎo)致測定結(jié)果出現(xiàn)一定的誤差。
2、乙醚抽提法:在高脂血樣本中加入有機(jī)溶劑乙醚,震蕩混勻后離心,可有效地將樣本中的甘油三酯等脂溶物質(zhì)萃取出來。但是由于該方法加入了新的化學(xué)物質(zhì),會對有些檢驗(yàn)項(xiàng)目的測定產(chǎn)生影響。
3、沉淀分離法:該方法來源于沉淀法測定HDL,即聯(lián)合使用磷鎢酸-鎂沉淀劑和聚乙二醇-硫酸葡聚糖沉淀劑,沉淀血清中的乳糜微粒、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白(a),該方法對部分檢驗(yàn)項(xiàng)目的測定會產(chǎn)生影響,且操作繁瑣,因此該法也有一定的局限性。
4、干化學(xué)法:干化學(xué)分析儀是采用以Kubleka-Munk理論為主要理論基礎(chǔ)的多層薄膜的固相試劑技術(shù),將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng),轉(zhuǎn)移到一個固相載體上,利用反射光度法和基于離子選擇電極(ISE)的差示電位法進(jìn)行檢測的一類新型儀器。當(dāng)全血通過多層薄膜的固相時,血細(xì)胞、脂濁微粒等物質(zhì)可以被阻截,因此該法亦可有效地去除脂濁對生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾。
5、高速離心法:將脂濁血清加蓋密封,經(jīng)高速離心后,血清可以分成兩層,吸取下層的血清進(jìn)行臨床生化測定,適用大部分臨床生化測定指標(biāo)的測定。但該法設(shè)備要求較高,中小醫(yī)療機(jī)構(gòu)沒有高速離心機(jī),限制了該法的使用。
一般情況下都不做特殊處理,進(jìn)行正常檢測,但在報(bào)告中會注明:嚴(yán)重脂血及結(jié)果僅供參考,建議復(fù)查。ALT、AST、UREA少數(shù)項(xiàng)目無法測出結(jié)果;TP、CREA結(jié)果偏低;TBIL、DBIL結(jié)果偏高,必要時可以對樣本進(jìn)行稀釋,但對結(jié)果會有影響。
脂血標(biāo)本是臨床常見的干擾原因,對比濁法和比色法的生化項(xiàng)目可以造成較大干擾。對不同的檢測項(xiàng)目可以采用不同的處理方法來消除干擾。
1)常用的化學(xué)方法有乙醚提取法,經(jīng)過乙醚處理的脂血標(biāo)本雖然可以排除脂濁對于ALT、AST、TP、TBIL、DBIL、HBDH、CK-MB、Crea等指標(biāo)的干擾,但是不能排除對ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、CA等指標(biāo)的干擾。生理鹽水稀釋法,是最常用的方法。還有沉淀分離法等。以上方法都需要注意基質(zhì)效應(yīng)的影響。
2)常用的物理學(xué)方法是高速離心法,高速離心法易于推廣,注意可能會得到溶血標(biāo)本。
3)干化學(xué)法較好,可以有效排除脂血的影響。
遇嚴(yán)重脂血標(biāo)本時,TG機(jī)外稀釋,其它生化項(xiàng)目檢測時我們用高速冷凍離心機(jī),1-1.5萬轉(zhuǎn)/分處理,效果不錯。
嚴(yán)重脂血的標(biāo)本,實(shí)驗(yàn)室有條件應(yīng)該進(jìn)行超速離心分離后在檢測;也可以進(jìn)行稀釋后再測,同時需要考慮稀釋后濃度過低超出檢測下限問題。
如方便,詢問患者是否進(jìn)食后采血,因?yàn)槌燥埡笥绕涫菙z入過多脂質(zhì)食物時,大量的乳糜微粒會進(jìn)入血液中形成脂血,干擾很多生化檢測項(xiàng)目的測定。如果是體檢或是慢性疾病患者建議嚴(yán)格空腹8小時后采血,如果是空腹采血患者或是急診患者,應(yīng)根據(jù)生化檢測項(xiàng)目進(jìn)行相應(yīng)的去血脂處理,如超速離心法、血脂清除劑等。在不具備清除血脂條件的基層實(shí)驗(yàn)室,脂血標(biāo)本測試完應(yīng)標(biāo)注標(biāo)本類型為脂血標(biāo)本,并告知臨床科室原因。
脂血標(biāo)本的處理
在生化檢測中,脂血可對 ALT、AST、GGT、ALP 等項(xiàng)目形成干擾。若因?yàn)榻o予腸外營養(yǎng)支持治療而出現(xiàn)的脂血標(biāo)本,會干擾患者正常檢測結(jié)果,脂血對血常規(guī)的影響主要是可通過影響 Hb 的比色測定導(dǎo)致 Hb 假性增高,MCH 及 MCHC 也隨之增高。此外,脂血標(biāo)本對凝血結(jié)果也會產(chǎn)生影響。 由于脂血還會影響血紅蛋白分析,所以危害性更甚于溶血,所以當(dāng)遇到有脂血時,我們會退回標(biāo)本,并建議患者隔天空腹檢查。若是沒法退回標(biāo)本并隔天空腹檢查的,我們要做好處理。
1、使用超速離心機(jī)離心
美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會( CLSI )推薦使用超速離心處理血脂樣本。常規(guī)離心后的血清加蓋密封,使用超速離心機(jī),促使乳糜微粒層分離出,然后吸下層清液再進(jìn)行檢測。超速離心機(jī)轉(zhuǎn)速要大于六萬轉(zhuǎn),如果不具備條件,可以使用高速離心機(jī),但要根據(jù)情況多離心幾遍。但是需要注意甘油三酯和膽固醇不建議使用高速離心后的血清進(jìn)行檢測,離心后檢測結(jié)果會低于離心前,尤其是甘油三酯下降明顯。
2、血清(血漿)稀釋法
血清(血漿)稀釋適用于使用血清(血漿)進(jìn)行檢測的項(xiàng)目,就是將血清(血漿)標(biāo)本加入多倍的生理鹽水,降低血清中脂蛋白含量,達(dá)到檢測目的,但是這種方法受到儀器分析能力的限制,而且當(dāng)稀釋倍數(shù)過大時還會造成稀釋誤差,都會造成結(jié)果不準(zhǔn)。
3血漿置換法
血漿置換適用于脂血的血常規(guī)標(biāo)本檢測,就是將血常規(guī)標(biāo)本低速離心后,分離混濁血漿,棄去渾濁血漿后,加入等量生理鹽水置換,如此反復(fù) 3 ~ 4 次以上,再進(jìn)行檢測。
4、公式計(jì)算法
這種方法針對于血常規(guī)檢測時血漿置換耗時費(fèi)力, HGB 校正值= HGB 校正前 - HGB 脂血血漿×(1- HCT 校正前)
注:HGB 校正前是指脂血標(biāo)本上機(jī)檢測血常規(guī)時得到的 HGB 值, HGB 脂血血漿是指將血常規(guī)標(biāo)本離心后吸取渾濁血漿單獨(dú)進(jìn)行全血細(xì)胞檢測時得到的 HGB 值, HCT 校正前是指脂血標(biāo)本上機(jī)檢測血常規(guī)時得到的 HCT 值。相關(guān)研究表明,脂血血常規(guī)檢測時,與血漿置換相比,公式計(jì)算法簡單快速,適合急診標(biāo)本。
以上這些方法都有著一定的局限性,比如說,甘油三酯和膽固醇離心后會降低,凝血中方法學(xué)是時間法的不可以使用稀釋法,血漿置換法很耗費(fèi)時間等等,所以需要我們根據(jù)臨床、項(xiàng)目等多方面考慮適用方法,盡可能消除脂血對于檢測的印象,出具準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報(bào)告。